带你近距离了解囊胚培养

2019-12-17 · 0人阅读 来源:医生专家团

一、胚胎评分和囊胚培养

胚胎的发育是个动态的过程,首先精子与卵子结合,形成受精卵,这是第0天(D0)。正常的受精卵进一步分裂发育,第1~3天(D1~3)的胚胎称为卵裂期胚胎;而发育潜力好的胚胎到第5~6天(D5~6)就会发育成囊胚。

胚胎师在高倍(200~400倍)显微镜下通过观察胚胎形态的各种指标对胚胎进行评级。通常外观漂亮、生长速度正常的胚胎相对评分较高,这种方法简单、迅速、无创伤,是国际上公认的评价胚胎质量的一个标准。

1、囊胚:D3胚胎的评分

对D3胚胎的评分,通常会注重卵裂球细胞数目、卵裂是否均一以及碎片这三个方面。

卵裂球细胞数目着重反映一个胚胎的卵裂速度,若其卵裂速度匀速且稳定,我们可以将其视为发育基本正常的胚胎;

大量临床数据显示,最佳的D3胚胎,其卵裂球细胞数目为7~9个,而且卵裂球细胞数目达8个的D3胚胎,其染色体异常的比例相比其他D3胚胎也是最低的,可以说是一个“好”胚胎。

而除了评估卵裂速度外,我们还会评估细胞分裂形态,即卵裂是否均一,换句话说,卵裂球之间是否有大小胖瘦之分。若卵裂球形态大小不一,通常这种胚胎发育潜能也较低。

另外一个评价指标是胚胎碎片,可以把它看成是胚胎在发育过程中产生的废物,是细胞凋亡的征象,一般认为与胚胎的质量和发育潜能相关。

综合这些指标,我们把胚胎分为四个等级:

Ⅰ~Ⅱ级的胚胎外观漂亮,卵裂球的数目适当,大小均一,产生无或者少的碎片,统称高评分胚胎;

Ⅲ级胚胎外观形态欠佳,发育潜力较弱,故Ⅰ~Ⅲ级的胚胎又统称可移植胚胎;

Ⅳ级胚胎几乎不具有发育潜力,因此建议废弃。

2、囊胚:D3胚胎评分的局限性

目前的D3(第3天)胚胎评分还停留在“以貌取胚”的阶段,这些评价标准是刻板的,存在一定的局限性。评分稍低的胚胎,其发育潜能未必不如评分高的胚胎。

跟对人的评价一样,胚胎的外貌固然重要,但内在美,即它的发育潜能才是关键。即使被评为同级胚胎,也还是有好坏之分的。

举个例子,有三个D3同样被评为Ⅲ级的胚胎:第一个是碎片较多的8细胞胚胎;第二个是细胞数少但没有碎片,是6细胞的Ⅲ级胚胎;第三个是碎片多的6细胞胚胎。

一般来说,优先移植第一个,其次是第二个,而第三个是最差的,但胚胎发育是一个动态过程,胚胎师观察到的只是一个时间点,或许过了没多久第二个6细胞胚胎又长到8细胞了呢。

3、囊胚:D3胚胎质量差时的应对策略

D3时Ⅲ级胚胎较多或全部是Ⅲ级胚胎,通常建议先冷冻1~2枚最好的,余下囊胚培养。对于1~2枚质量较差的Ⅲ级胚胎,通常建议新鲜周期直接移植而不建议单独冷冻;

至于是否新鲜周期囊胚培养形成后再移植,就要看具体情况了:

(1)如果前次IVF无可移植胚胎,这次好不容易有可用胚胎了,那肯定选择移植D3胚胎;(2)如果是首次移植或移植过一次未成功,这次D3仅1~2枚Ⅲ级胚胎,也可选择移植D3胚胎;

(3)如果是反复多次移植失败,那么即使胚胎数少、胚胎质量差,通常也建议囊胚培养形成后再移植。

所以说,每个人的具体情况不同,采取的临床策略也不尽相同,评分较低的Ⅲ级胚胎不是一定要选择废弃的,或是选择囊胚培养,任它在体外自生自灭、听天由命,鼓励听从医生的建议,进行移植还是有一定的成功希望的。

移植一枚Ⅰ级的D3胚胎的成功率大概是50%,移植一枚Ⅱ级的D3胚胎的成功率约35%,而移植一枚Ⅲ级的D3胚胎的成功率约为20%。

4、囊胚:选择性单囊胚移植

所谓的囊胚培养,就是将D3胚胎移入囊胚培养液,再培养2~3天,通过延长培养时间,筛选出更具“活力”的胚胎,淘汰掉一批发育潜力差的胚胎。这个过程是在体外人工的环境下进行的,当然比母体环境要差。

发育潜力很好的胚胎即使在体外培养条件下,依然能形成好囊胚;但换句话说,在体外培养条件下不能形成囊胚的胚胎,不一定在母体内就不能着床怀孕。也就是说,进行囊胚培养并不能改写单个胚胎的不良命运!

根据患者的年龄,不孕病史,手术史,取卵后第3天的胚胎评分情况进行选择,在取卵后的第5天移植一个囊胚,这就叫做选择性单囊胚移植。

数据显示,目前仅有约~50%左右的卵裂期胚胎在体外条件下可发育到囊胚,如果完全进行囊胚培养将有20%~40%的患者因没有胚胎发育到囊胚而取消移植。

囊胚培养液不是“神仙水”,没有让胚胎转危为安、起死回生的能力;囊胚培养也不是“万金油”,不是每个人都适合去做。

那么哪些情况适合囊胚培养?

不明原因反复种植失败,怀疑胚胎发育潜能受限,一般女性年龄在35岁以下;D3胚胎数大于4枚,由于囊胚移植着床率高,可尽早妊娠,省时又经济;子宫内膜与卵裂期胚胎发育不同步时,进行囊胚移植,可以纠正这种不同步,改善妊娠结局;

5、囊胚:进行胚胎植入前遗传学诊断或筛查。

当您遇到D3胚胎评分低的情况,请不要过分担心,D3胚胎的结局无法改变,需要制定最适合的胚胎移植策略。

二、什么样的囊胚是好的囊胚

在做试管婴儿治疗的通常情况下,精卵受精后,我们会选择发育至第3天或者第5天的胚胎移植至体内,发育至第3天的胚胎称为卵裂期胚胎,而发育至第5~6天的胚胎称之为囊胚。

1、为什么要养囊胚,对我有什么好处吗?

在生理状态下,精卵结合发生在输卵管内,形成囊胚后时正好游走至子宫腔内着床,因此在体外受精形成的囊胚移植日与子宫内膜种植窗的时间刚好匹配。

另外,囊胚的形成对于胚胎的选择是一个优胜劣汰的过程,只有发育潜力好的胚胎才能形成囊胚哦,所以囊胚的种植率很高的。

过去我们一般会选择2枚第3天的胚胎移植,成功率不错,但是这大大的增加了多胎率,增加了母婴的风险;而囊胚一般仅选择移植一枚,这样既保持了较高的妊娠率又降低了多胎率,真是一举两得呢。

2、什么样的囊胚才算是好的囊胚?

卵子受精后,一般在第五天就有可能发育至囊胚期,细胞间开始形成囊胚腔,内充满液体。囊胚主要是由囊胚腔、内细胞团、滋养外胚层组成

内细胞团将来发育成胎儿,而滋养层细胞将来分化发育为胎盘,为胎儿后续发育提供营养。

目前应用最为广泛的是Gardner提出的囊胚评价方法,从囊胚腔的扩张状态(发育速度)、内细胞团(内涵)和滋养外胚层(颜值)的发育对囊胚进行评估。

根据囊胚腔的大小和是否孵化(发育速度),将囊胚发育分为6个时期:

1期:早期有腔室囊胚,囊胚腔<胚胎总体积的1/2

2期:囊胚腔体积≥胚胎总体积的1/2

3期:完全扩张囊胚,囊胚腔完全占据胚胎的总体积

4期:扩展囊胚,囊胚腔完全充满胚胎,胚胎体积变大,透明带变薄

5期:正在孵出的囊胚,囊胚的另一部分从透明带逸出

6期:孵出的囊胚,囊胚全部从透明带中逸出

其中1期、2期又被统称为早期囊胚。

1期2期的早期囊胚,由于囊胚腔较小,难以准确区分内细胞团的界限。故而将处于3~6期的囊胚内细胞团质量进行分级如下:

A级:细胞数目多,排列紧密

B级:细胞数目少,排列松散

C级:细胞数目很少

滋养层细胞(颜值)分级,3~6期的囊胚的滋养层细胞分级如下:

A级:上层细胞由较多的细胞组成,结构紧密

B层:上层细胞由不多的细胞组成,结构松散

C层:上皮细胞由稀疏的细胞组成

大量文献证实内细胞团的大小和质量与种植率存在密切关系。另外,过去认为滋养层细胞对种植率影响不大,但近几年的研究发现,滋养层的质量对种植率的影响甚至要大于内细胞团,这一观点也被我中心的实验数据所验证。

综上所述,当亲们听到医生告诉您的第5天胚胎是4AA级或4AB级囊胚的时候就该明白这是一枚囊胚腔扩张,内细胞团和滋养外胚层都是优质的囊胚哦。

根据目前的文献显示,A级和B级的囊胚在临床妊娠方面比较并无显著的差异,但C级的囊胚,着床率明显下降。

不同的胚胎发育速度也是不一致的,有的胚胎可能在第6~7天才能形成囊胚。虽然最终都跑到了终点,但较早形成的囊胚可以获得更好的妊娠。

当然,谁能保证你舍弃的那枚第7的囊胚就不是“阿甘”呢!亲们看明白了吗,做囊胚如做人,发育迟缓的是容易被抛弃的,颜值再高没有内涵也是没有前途的,只有在适当的时期发育至适当的形态,身强体壮、徳才兼备才是王道呀!

3、囊胚虽优秀,养囊需谨慎!

囊胚培养技术已十分成熟,在我们中心囊胚的形成率可达60%,但即使是最优秀的胚胎师也无法准确预计囊胚的形成,没有囊胚形成使得无胚胎移植的情况也时有发生。

此外,也有文献说,囊胚培养的子代出生体重偏重,对人类以后发展影响还需要更多的研究哦!

不过不用担心,目前培养囊胚的策略主要指针对卵巢储备好的女性进行再次优选胚胎,当然也适用于反复种植失败的患者,医生会根据你的具体情况,给出科学的个体化建议的!

三、有关囊胚的谣言

谣言一:四个胚胎放一起才能形成一个囊胚呢!

事实是:受精卵发育到第三天形成胚胎,第五天形成囊胚。理论上应该是一个胚胎发育成一个囊胚,四个胚胎长在一起是不可能的事情。如果真的有四个胚胎长到了一起,那就是个八倍体的怪物了。

谣言二:囊胚形成率低,胚胎都浪费了!

事实是:胚胎发育到囊胚阶段,又经历了一次筛选,囊胚更具发育潜能,具有更好的种植能力。当然,个别病友囊胚形成率特别低的原因是因为胚胎质量较差,这种胚胎即使移植进宫腔,妊娠率也是很低的。

谣言三:囊胚都能看出来性别了!

事实是:性别分化出现在胚胎发育第9周,囊胚时期是完全看不出来的啦。

谣言四:移植囊胚的妊娠率一定比胚胎高!

事实是:胚胎和囊胚都有各自的级别,同样优质的情况下,囊胚的妊娠率应该高于胚胎,但是如果级别较低的囊胚可就比不上优质的胚胎喽!

谣言五:移植一枚囊胚就不会发生卵巢过度刺激综合征了!

事实是:新鲜周期移植一枚囊胚,妊娠后仍然可能会发生卵巢过度刺激综合征,但是严重程度相对于直接移植两枚胚胎的患者要轻得多。

这是因为妊娠后发生的卵巢过度刺激综合征的严重程度与血HCG的水平是正相关的。

谣言六:移植一枚囊胚怀孕一定是单胎妊娠。

事实是:移植一枚囊确实能大大降低多胎妊娠的发生率,但是还是有比较小概率的机会发生双胎、甚至三胎妊娠的情况。

这种情况一般是由于囊胚从透明带孵出的时候内细胞团分裂成了两团甚至更多。

这种多胎是单卵多胎,发生双胎输血综合征的风险较高,孕期应当高度警惕。

粉碎了这六大谣言之后,还想提醒您的就是,有疑问一定要请生殖中心的工作人员进行解答,不能偏听偏信、道听途说!被谣言骗了,损失的是时间、精力和金钱。

总之,以下情况建议进行囊胚培养:

1.胚胎较多,需要进一步优选;

2.取卵后第三天,发生卵巢过度刺激综合征风险较高时;

3.多次宫外孕病史;

4.反复种植失败而无明显原因的。

医生专家团温馨提醒:

"Ⅰ~Ⅱ级的胚胎外观漂亮,卵裂球的数目适当,大小均一,产生无或者少的碎片,统称高评分胚胎; Ⅲ级胚胎外观形态欠佳,发育潜力较弱,故Ⅰ~Ⅲ级的胚胎又统称可移植胚胎; Ⅳ级胚胎几乎不具有发育潜力,因此建议废弃。"

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